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T细胞的尊龙凯时人生就博体外分选与扩增

发布时间:2025-02-19   信息来源:尊龙凯时官方编辑

在免疫应答中,T细胞的激活信号通路扮演着至关重要的角色。T淋巴细胞活化是免疫反应的基础,主要受到双重信号的控制。第一个信号是特异性抗原识别信号,这一信号通过抗原呈递细胞(APC)表面的MHC-抗原肽复合物与T细胞受体(TCR-CD3复合体)结合,形成MHC-TCR-CD3复合体,从而将信号传导到细胞内部,激活下游信号通路,如钙调蛋白、MAPK与NF-κB等。这些信号通路的协同作用引起T细胞的增殖、迁移、细胞因子生产及效应功能,使T细胞从静止状态转变为增殖与活化状态。

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为了完成T细胞的活化,第二个信号,即共刺激信号也至关重要。CD28是T细胞上的一个关键共刺激信号受体,它为MHC-TCR信号提供了增强的主激活信号。CD28的配体包括CD80(B7/BB1或B7-1)和CD86(B7-2),与CD28结合后共同刺激被TCR-CD3复合体传递的信号,进一步激活T细胞,使其增殖并分泌相关的白细胞介素(IL-2、IL-4和IL-10等)以及上调防止细胞凋亡的蛋白Bcl-xL的表达。通过与CD3信号的协同作用,T细胞的增殖和活化得以显著增强。

在体外,T细胞的激活和扩增需要持续而充分的刺激。通过逆转录病毒载体转导CARcDNA,同样需要T细胞的活化以实现转录与翻译。正如之前提到的,T细胞活化依赖于由T细胞受体(TCR-CD3)传递的主特异性信号(信号1)以及共刺激信号(如CD28、4-1BB或OX40,信号2)共同作用。结合活化的方式,可以分为基于细胞的T细胞活化与基于抗体的T细胞活化。

基于细胞的T细胞活化依赖于抗原呈递细胞,如树突状细胞(DC)或人工抗原呈递细胞(AAPCs)。然而,DC细胞的稳定性因个体差异而异,AAPCs的生产和选择则需要额外资源。而抗CD3/CD28单克隆抗体通过靶向CD3/CD28分子胞外结构,能够激活T细胞。因此,可以利用抗CD3提供第一信号,抗CD28提供共刺激信号,以实现T细胞的活化与扩增。目前,体外T细胞的激活与扩增主要基于相关刺激信号分子的抗体(如抗CD3/28抗体或抗CD3/28抗体包被的磁珠)。

尊龙凯时人生就博的AcnoviaBeads Human T-Activator CD3/CD28(产品编号:AC68969)是一种均匀的聚苯乙烯和聚烯球形珠子,已经被制备成可磁化和超顺磁性。这意味着在无磁场环境下,磁珠可以轻易被重新悬浮。这一特性使其在目标特异性抗体的附着后,能够从复杂的悬浮液(如血液)中高效捕获和分离细胞,同时无须离心或色谱柱分离技术。

通过将磁珠与针对细胞表面活化分子的抗体偶联,这些磁珠可以用作细胞的分离与扩增。AcnoviaBeads Human T-Activator CD3/CD28磁珠通过偶联抗人CD3和抗人CD28抗体,实现了T细胞的分选、富集和活化,极为实用。使用这种磁珠,分离并激活来自健康供体的PBMC中的CD3+ T细胞时,分选效率非常高。

在经过48小时的培养后,活化的CD3+ T细胞被进行流式细胞术分析,采用anti-human CD25-APC和anti-human CD69-PE进行荧光染色。此过程中,AcnoviaBeads Human T-Activator CD3/CD28还被用来刺激纯化的CD3+ T细胞,显示出在补充300 IU/mL IL-2的培养基中可实现的细胞增殖及细胞活率效果。

尊龙凯时人生就博的产品展现出优秀的性能,能够大幅简化离体T细胞的分选和活化过程,为生物医学研究提供了强有力的支持。