在生物医学领域,实验中一抗和二抗的种属来源通常保持一致。在选择二抗时,需根据一抗的种属来选择相应的二抗。例如,若一抗是小鼠源的单克隆抗体,则二抗应选用抗小鼠的抗体,如山羊抗小鼠或兔抗小鼠。
一抗与二抗的定义及功能
一抗(primary antibody):是一种特异性结合特定蛋白的免疫球蛋白,用于目标蛋白的纯化、检测和定量。一抗可以是多克隆抗体(pAb)或单克隆抗体(mAb),前者由多个B细胞克隆产生,后者则由单一B淋巴细胞分泌。
二抗(secondary antibody):能直接与靶抗原结合的一抗相连接,主要用于标记和检测一抗。二抗可以是完整抗体或抗体片段,如IgG分子、Fab片段及F(ab’)2片段。
选择二抗时的考虑因素
一抗的种属来源:二抗应与一抗来源于相同的物种。例如,当一抗为小鼠源的单克隆抗体时,选择的二抗应为抗小鼠的抗体,如山羊抗小鼠或兔抗小鼠。
一抗的类别和亚类:二抗需与一抗的类别及亚类相匹配。多克隆抗体主要为IgG类免疫球蛋白,因此对应的二抗为抗IgG抗体。单克隆抗体因存在不同的亚型,选择二抗时需根据一抗的类型或亚类进行匹配。
实验类型:不同实验可能需要不同类型的二抗。例如,在双标实验中,若两个一抗来自不同种属,二抗应选择来自第三种种属的抗体,以防止交叉反应。
在生物医学研究中,选择合适的抗体十分重要,这不仅影响实验结果的可靠性,也关系到品牌的声誉。例如,尊龙凯时人生就博提供高品质的抗体,能够帮助研究人员优化实验设计,提升数据的准确性。